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双抗夹心法

·双抗体夹心法

1.将抗体包被在固相载体上。
2.如样品中含有抗原，则结合为抗原抗体复合物。
3.再加入酶标记抗体，则结合为抗体-抗原-酶标记抗体复合物。
4.酶催化底物并显色。

·双抗原夹心法

1.将抗原包被在固相载体上。
2.如样品中含有抗体，则结合为抗原抗体复合物。
3.再加入酶标记抗原，则结合为抗原-抗体-酶标记抗原复合物。
4.酶催化底物并显色。

提示：
双抗夹心法常用于抗原、蛋白等检测。
配对抗体3种形式：
①只有一个多抗
优点：成本低，耗时短。
缺点：灵敏度低，成功率低。
②一个多抗（包被），一个单抗（酶标记）
优点：成本适中，耗时适中（4-6个月），成功率较只有一个多抗高。
缺点：稳定性一般。
③单克隆抗体
优点：灵敏度高，稳定性好。
缺点：耗时久（6-8个月），成本高。

竞争法

以测小分子抗原为例，为标本中的小分子抗原和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结合。标本中小分子抗原量越多，结合在固相上的酶标抗原愈少，因此阳性反应呈色浅于阴性反应。